Diare yang disebabkan oleh bakteri patogen Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli merupakan ancaman kesehatan serius. Penggunaan antibiotik
secara menerus berisiko memicu resistensi, sehingga kombucha rosemary diteliti
sebagai alternatif antibiotik alami. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui
konsentrasi gula yang menghasilkan total asam dan pH serta mengetahui aktivitas
antibakteri kombucha rosemary terhadap S. aureus dan E. coli berdasarkan daya
hambat dan konsentrasi hambat minimum. Tahapan penelitian ini dilakukan
dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) satu arah dengan
perlakuan antibiotik ciprofloxacin dan kontrol negatif (akuades dan rosemary),
konsentrasi gula aren yaitu 10%, 20%, 30%, dan 40% dengan 5 kali pengulangan.
Tanaman rosemary yang digunakan dilakukan determinasi dan kombucha
rosemary yang dihasilkan dilakukan analisis pH, total asam dan analisis fitokimia
kualitatif flavonoid, tanin, dan saponin. Uji kemurnian bakteri uji meliputi uji
kemurnian katalase, pengecatan Gram, fermentasi karbohidrat, uji motilitas dan
koloni tuggal. Aktivitas antibakteri diukur berdasarkan zona hambat dan
konsentrasi hambat minimum. Hasil di analisis menggunakan ANOVA satu arah.
Hasil kombucha rosemary mengandung senyawa flavonoid, tanin, dan saponin,
dengan pH 4,2 dan total asam 7,26%. Zona hambat E.coli terendah pada
konsentrasi 10% dan tertinggi pada konsentrasi 30% yaitu 5,71 ± 0,57 ; 10,15±
1,21 pada S. aureus didapatkan zona hambat terendah pada konsentrasi 10% dan tertinggi pada konsentrasi 30% yaitu 5,74 ± 1,94; 7,38 ± 0,83. Konsentrasi hambat minimum kombucha rosemary pada S. aureus pada konsentrasi gula 25% dan pada kontrol positif 0,0002% sedangkan pada E. coli pada konsentrasi 27,5% dan kontrol positif 0,0003%.