Salah satu alasan utama mengapa rumput laut digunakan menjadi bahan baku biodiesel adalah kandungan minyak nabati pada rumput laut jauh lebih banyak jika dibandingkan dengan kacang kedelai, kapas, jatropha (jarak pagar) dan lain-lain. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui: a) potensi kandungan minyak dari rumput laut Ulva, Sargassum dan Turbinaria serta b) pengaruh lokasi pengambilan rumput laut terhadap kandungan minyak ketiga rumput laut tersebut. Sampel rumput laut diambil dari pesisir selatan Kabupaten Gunungkidul, DIY dari marga Turbinaria, Ulva dan Sargassum. Sampel dikeringkan dalam oven, kemudian dihaluskan menggunakan blender. Serbuk rumput laut yang diperoleh disimpan dalam plastik untuk diekstraksi kandungan minyak nabatinya. Minyak yang diperoleh diukur angka penyabunan dan tingkat pengapiannya. Hasil ekstraksi minyak dari sampel rumput laut dari pantai Drini adalah 2,66, 0,33, dan 1,1% masing-masing untuk Ulva, Sargassum, dan Turbinaria. Sedang sampel dari pantai Sepanjang hasilnya 3,6, 0,3, dan 1,66% masing-masing untuk Ulva, Sargassum, dan Turbinaria. Secara umum kandungan minyak rumput laut hasil penelitian ini lebih besar daripada yang dilaporkan para peneliti terdahulu. Simpulan penelitian ini adalah: 1) rumput laut Ulva, Sargassum, dan Turbinaria dari pantai selatan Gunungkidul DIY berpotensi mengandung minyak yang dapat digunakan sebagai bahan dasar biodiesel dan 2) kandungan minyak dalam rumput laut berbeda berdasarkan lokasi (habitat) dan jenis rumput laut.