Penelitian ini dilakukan untuk mengkaji variasi kadar pati, variasi waktu
dan variasi mikrobia dalam memproduksi etanol. Pembuatan etanol menggunakan
substrat pati jagung tidak dapat langsung dilakukan oleh Saccharomyces
cerevisiae dan Zymomonas mobilis. Oleh karena itu, digunakan jamur Rhizopus
oryzae dalam proses sakarifikasi polisakarida menjadi monomer glukosa.
Penelitian ini terdiri dari 2 tahapan yaitu tahap sakarifikasi dan tahap fermentasi
etanol pada substrat pati jagung hasil sakarifikasi. Pada tahap I menggunakan
variasi kadar pati yaitu sebesar 2, 3, dan 4 %. Parameter yang diukur pada tahap
sakarifikasi terdiri dari pengukuran gula reduksi dan pH medium. Hasil gula
reduksi tertinggi pada tahap pertama dilanjutkan pada tahap fermentasi etanol
dengan menggunakan Rhizopus oryzae, Saccharomyces cerevisiae dan
Zymomonas mobilis. Parameter yang diukur pada tahap fermentasi etanol terdiri
dari pengukuran gula reduksi, pengukuran biomassa sel dan pengukuran kadar
etanol. Rancangan percobaan yang digunakan adalah RAL faktorial. Data yang
diperoleh dianalisis dengan ANAVA menggunakan SPSS versi 15.0 pada tingkat
kepercayaan 95%, sedangkan untuk mengetahui letak beda nyata antar perlakuan
digunakan DMRT. Berdasarkan hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar pati
jagung sebesar 4 % (b/v) pada proses sakarifikasi menghasilkan kadar gula
reduksi tertinggi yaitu 0,560 % (b/v)pada waktu inkubasi jam ke-72. Kadar etanol
maksimal dihasilkan oleh Saccharomyces cerevisiae yaitu sebesar 1,7367 % pada
waktu inkubasi 72 jam