Limbah cair rumah sakit merupakan campuran dari bahan-bahan sisa yang tidak digunakan lebih lanjut untuk kebutuhan rumah sakit. Parameter yang menjadi fokus dalam penelitian ini yakni kadar Fosfat dan Amonia, dikarenakan kadar Fosfat dan Amonia dari hasil pengolahan limbah cair rumah sakit sering melampaui standar baku mutu. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menegtahui jumlah sel total dari Pseudomonas putida yang efektif dalam menurunkan kadar fosfat dan amonia dari limbah cair rumah sakit agar sesuai standar baku mutu. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan 4 variasi perlakuan dengan 3 kali ulangan. Perlakuan yang digunakan yakni perlakuan A (tidak ada penambahan bakteri P.putida pada limbah cair/kontrol), perlakuan B (penambahan 3 tabung reaksi bakteri P.putida, perlakuan C (penambahan 4 tabung reaksi bakteri P.putida) dan perlakuan D (penambahan 5 tabung reaksi bakteri P.putida). Hasil yang diperoleh dalam penelitian ini yaitu penambahan 4 tabung reaksi bakteri P. putida dengan jumlah kepadatan sel total bakteri 89,2 x 108 sel/tabung kedalam limbah cair yang paling efektif menurunkan kadar fosfat dan amonia dalam waktu 18 hari dengan persentase penurunan kadar fosfat sebesar 70,4033 % dan untuk kadar amonia sebesar 89,7200 %